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1517年，他移居法国，两年后在法国去世。
虽然在人生的最后20年，达·芬奇把更多的精力投入到科学研究方面，但也创作了一些绘画作品，如1503年受佛罗伦萨市的委托绘制的壁画《安加利之战》，以及在绘画史上享有盛名的肖像画《蒙娜丽莎的微笑》。
画面中的少妇蒙娜丽莎穿着一身黑色的衣服，从她那望向画外的双眼和微微翘起的嘴角处，流露出一丝让人难以捉摸的微笑，也就是世人所说的“神秘的微笑”
。
她的身后是起伏的远山、平静的湖泊与曲折的小路。
蒙娜丽莎正注视着前方，眼神平静而专注，她的脸饱满而圆润，两片嘴唇微微抿在一起，她的右手轻轻地搭在左手上面，比现代精妙的摄影更具体积感。
值得注意的是，达·芬奇并没有给她画上眉毛，这是因为按照当时的审美观念，眉毛会使眼睛看起来不够清澈、透亮。
达·芬奇就是以这样一个年轻女性神秘的微笑把文艺复兴所崇尚的人文主义精神推向了顶峰。
虽然《蒙娜丽莎的微笑》在西方艺术史上的地位很高，但直到20世纪初，在名画云集的卢浮宫，它也仅仅被看作是众多文艺复兴画作之一，普通民众对其知之甚少。
但1910年它却离奇失踪了，1913年才又被寻回。
也算“因祸得福”
，《蒙娜丽莎的微笑》从此一跃成为卢浮宫的镇馆之宝。
谁偷走了“丽莎女士”
《蒙娜丽莎的微笑》失而复得的经历，真可谓惊心动魄。
第一个发现它失窃的，是一位叫路易·贝鲁的临摹画师。
卢浮宫的工作人员在接到贝鲁的询问后，在专门拍摄卢浮宫藏品的摄影师那里也没有找到，这才发现“丽莎女士”
失踪了！
在警察散发的印有《蒙娜丽莎的微笑》的传单的帮助下，法国人不仅知道了这幅画的名字，还知道了“丽莎女士”
的样子。
很快，全世界人民也从各自国家的报纸上了解了这件失窃案。
在寻找“丽莎女士”
的过程中，很多人都被作为怀疑对象遭到调查，其中名气最大的嫌疑犯是大画家毕加索，他甚至还上了法庭来证明自己的清白。
“丽莎女士”
失踪两年后，真凶浮出水面，他就是最早被怀疑的为卢浮宫的名画换画框的意大利工匠文森佐·佩鲁贾。
他之所以偷这幅画，是因为他觉得“丽莎女士”
是意大利人的，而法国人却抢走了她！
但他不知道的是：这幅画是达·芬奇到法国做宫廷画师时送给国王弗朗索瓦一世的礼物，并不是从意大利抢来的。
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